CAT测定

对遗传性癫痫大鼠脑内

GAT1

和

GAT3

表达的影响

背景

在突触间隙中，

GABA

清除的唯一途径就是通过

GABA

转运体（

GAT

）来实现的。位于神

经元和胶质细胞上的

GAT

能够快速摄取突触间隙和细胞外液的

GABA

，

以终止其对突触后膜

受体的作用，

结束

GABA

的突触传递过程。

因此，

GAT

是调节

GABA

能抑制性神经活动的重要

糖蛋白。

目前研究表明，

GAT1

和

GAT3

是脑中表达最丰富的两种亚型，

且与癫痫的发生最为密

切。

材料与方法

动物

主要试剂和仪器

TRM

大鼠

（

tm

）

由中国医科大学药学院

2000

年从日本京都大学引进的

模型种鼠自行繁殖，

Wistar

大鼠由中国医科大学实验动物部提供。

TRM

大鼠、

Wistar

大鼠均

为

9-12wk

，

♀、

♂不限。

TRIzol

（

TaKaRa

）

，

GAT1

、

GAT3

和

β

-actin

引物由

TaKaRa

公司合成，

托吡酯，

SYBR PrimeScript RT-PCR Kit 

Ⅱ（

Perfect Real Time

）试剂盒［

宝

生物工程（

大连）有限公司］，兔抗鼠

GAT-1

和

β

-actin

多克隆抗体（

美国

Santa Cruz

公

司）

，

兔抗鼠

GAT-3

多克隆抗体

（

英国

Abcam

公司）

，

Real 

Time 

PCR

仪

（

ABI 

7500 

Fast 

Real-Time 

PCR System

）

,DYY-5

型稳流稳压电泳仪（

北京六一仪器），

GDS-8000

型凝胶成像系统（英

国

UVP

公司），

Hoefer miniVE

垂直电泳，印迹系统（

美国

Amersham Biosciences

公司）。

实验动物分组及给药

取

9-12wk

的

Wistar

大鼠

5

只和

TRM

大鼠

15

只，

然后将

15

只

TRM

大鼠

随机分成

3

组，

每组各

5

只。

一共分为

4

组：

阴性对照组；

TRM

组；

40mg

·

kg

-1

TPM

组

（

TPM40

）

；

80mg

·

kg

-1

TPM

组（

TPM80

），

TPM40

组和

TPM80

组分别腹腔注射给予相应剂量新鲜配置的托吡

酯药物，阴性对照组和

TPM

组分别在相同时间点腹腔注射生理盐水（

10ml

·

kg

-1